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運(yùn)用單因素試驗(yàn)法對影響也門鐵ISSR-PCR擴(kuò)增的各個(gè)因素進(jìn)行了優(yōu)化,優(yōu)化體系為:25μL反應(yīng)體系中,Taq酶濃度0.04 U.μL-1、dNTPs濃度0.18 mmol.L-1、引物濃度0.4μmol.L-1、Mg2+濃度2.0mmol.L-1、模板濃度0.8 ng.μL-1、甲酰胺濃度1.6%、1×buffer,最后用dd H2O補(bǔ)足到25μL。利用優(yōu)化體系和篩選的引物對也門鐵及其嵌合體品種進(jìn)行了ISSR擴(kuò)增分析。
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