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從紫葉李葉片中提取高質(zhì)量RNA是研究葉色相關(guān)基因表達(dá)調(diào)控的必要前提。實(shí)驗(yàn)室常用的RNA提取方法和RNA提取試劑盒有很多種,每種方法只適合某些組織材料。對(duì)彩葉植物來說,組織中的次生代謝物含量很高,葉片中的花色素苷、多糖更是高質(zhì)量核酸提取過程中難以去除的干擾成分。本文利用CTAB法、SDS法以及Trizol法從富含花青素類物質(zhì)的彩葉植物紫葉李葉片中提取總RNA。電泳檢測(cè)顯示:CTAB法提取的總RNA其28S、18S條帶清晰,紫外光譜分析A260/A280比值為1.93,A260/A230比值為2.04,RNA產(chǎn)量可達(dá)141μg·g-1·FW-1;而且通過RT-PCR擴(kuò)增出了目的基因的cDNA片段,說明利用此法分離的RNA純度和濃度符合反轉(zhuǎn)錄PCR的要求,而且能去除色素分子的干擾。SDS法提取的總RNA產(chǎn)量較低,且純度不高。而Trizol法很難從紫葉李中提出完整的RNA。因此CTAB法是一種從富含花青苷的紫葉李葉片中有效提取高質(zhì)量總RNA的方法。
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雙吸三元扭曲葉片離心泵具有葉片形狀復(fù)雜與多流道等特征,其三維造型涉及問題較多,在泵的三維造型中具有普遍性。為此,以GAMBIT軟件為設(shè)計(jì)平臺(tái),結(jié)合一個(gè)具體的雙吸離心泵的造型實(shí)例,介紹了雙吸離心泵扭曲葉片葉輪和螺旋形蝸殼等部件三維造型的方法,并給出了創(chuàng)建實(shí)體模型的詳細(xì)步驟及三維模型圖;此外,還簡(jiǎn)要說明了在Gambit軟件中建模需要注意的問題。
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