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目的:探討在副溶血性弧菌食物中毒檢測(cè)中使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的臨床價(jià)值。方法:選取30份衛(wèi)生防疫站食物中毒患者肛拭子標(biāo)本,均采用GB與實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè),對(duì)比兩種檢測(cè)方法陽(yáng)性率。結(jié)果:直接檢測(cè)GB法陽(yáng)性率為23.3%,PCR法陽(yáng)性率為100.0%,對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:在副溶血性孤菌食物中毒檢測(cè)中使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)價(jià)值重大,可推廣使用。
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目的:建立快速、靈敏、特異地檢測(cè)金黃色葡萄球菌腸毒素A的熒光定量PCR檢測(cè)方法。方法:以SEA基因作為腸毒素A的檢測(cè)靶序列,設(shè)計(jì)熒光定量PCR引物和Taqman探針,優(yōu)化反應(yīng)體系的主要成分濃度和循環(huán)條件,評(píng)價(jià)方法的靈敏度、特異性和重復(fù)性,并對(duì)22株食物中毒中分離的金黃色葡萄球菌進(jìn)行腸毒素A的檢測(cè)。結(jié)果:建立金黃色葡萄球菌腸毒素A的熒光定量PCR檢測(cè)方法。25μl熒光定量PCR反應(yīng)體系主要成分濃度分別為Mg2+7.0 mmol/L,dNTP 0.3 mmol/L,引物0.4μmol/L,探針0.7μmol/L,TaqDNA聚合酶2.5U。方法可檢出最低45個(gè)拷貝的細(xì)菌DNA,特異性和重復(fù)性良好。從22株食物中毒中分離的金黃色葡萄球菌中檢出腸毒素A陽(yáng)性菌株6株。結(jié)論:熒光定量PCR可快速、準(zhǔn)確的檢出金黃色葡萄球菌的腸毒素A,能為金黃色葡萄球菌食物中毒診斷提供依據(jù)。
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