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利用全轉(zhuǎn)錄工程(Global transcription machinery engineering,gTME)方法對(duì)野生型釀酒酵母(Saccharomyces scerevisiae)GX7菌株進(jìn)行了改造。通過(guò)PCR方法克隆獲得釀酒酵母轉(zhuǎn)錄因子spt15基因,與表達(dá)載體pYX418連接,構(gòu)建了重組子pYX418-spt15,并對(duì)SPT15蛋白的177、195和217位點(diǎn)進(jìn)行了定點(diǎn)突變,然后醋酸鋰轉(zhuǎn)化入釀酒酵母GX7中,利用不同濃度的G418抗性篩選得到重組突變釀酒酵母菌株GX7-1,經(jīng)初步研究表明:重組菌株細(xì)胞表型發(fā)生了變化,生長(zhǎng)速度加快,并可以發(fā)酵木糖生成木糖醇和乙醇。為構(gòu)建新型工業(yè)釀酒酵母奠定了理論基礎(chǔ)。
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目的:制備殼聚糖-聚乙烯醇復(fù)合凝膠基質(zhì),考察不同相對(duì)分子質(zhì)量,不同濃度的殼聚糖對(duì)復(fù)合凝膠的抗菌抑菌性能的影響。方法:采用一劑量法對(duì)不同相對(duì)分子質(zhì)量不同濃度的殼聚糖凝膠、殼聚糖-聚乙烯醇復(fù)合凝膠對(duì)大腸桿菌的抑菌效果進(jìn)行比較。結(jié)果:隨殼聚糖濃度增大對(duì)大腸桿菌抑菌效果逐漸增強(qiáng),隨殼聚糖相對(duì)分子質(zhì)量的減小抑菌效果增強(qiáng),但相對(duì)分子質(zhì)量小于5 000時(shí)無(wú)抑菌圈。結(jié)論:明確了殼聚糖相對(duì)分子質(zhì)量和濃度對(duì)殼聚糖-聚乙烯醇復(fù)合凝膠抗菌抑菌作用的影響。確定殼聚糖-聚乙烯醇復(fù)合凝膠中殼聚糖適宜的相對(duì)分子質(zhì)量為60 000、濃度為2%。殼聚糖作為一種新的藥用材料與聚乙烯醇合用對(duì)大腸桿菌具有良好的抑菌作用,為新藥開(kāi)發(fā)奠定良好基礎(chǔ)。
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