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目的建立聚合酶鏈反應(PCR)產物直接酶標記微孔板反向分子雜交法用于人乳頭瘤病毒(HPV)型別鑒定。方法利用HPV通用引物介導PCR(GPPCR)擴增靶DNA,然后對產物直接標記辣根過氧化物酶復合物(HRPPEIQI),與預先包被在微孔板上的HPV寡核苷酸探針雜交后酶顯色法檢測。結果HPV各型之間無交叉雜交;雜交靈敏度可達13~76個病毒DNA拷貝,比PCR瓊脂糖凝膠電泳檢測高10倍;該法重復性好,陽性孔批內CV為6.34%,批間CV為10.53%,陰性孔批內CV為1%,批間CV為5.79%;而且雜交影響因素較少。結論該法特異性強、靈敏度高、操作簡便,無放射性和EB染料污染,雜交時間短、儀器讀取結果,便于大量常規(guī)臨床樣本定性或定量檢測。