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本研究以狗牙根幼葉為為試材,采用單因子試驗和正交設(shè)計試驗2種方法,對SRAP-PCR反應(yīng)體系進行優(yōu)化試驗,結(jié)果表明狗牙根25μLSRAP-PCR最佳反應(yīng)體系為:1.5mmol/LMg2+、0.25mmol/LdNTP、0.4μmol/L引物、1.5UTaq酶和80ng模板DNA,最佳退火溫度為50.6℃。運用該體系對30份狗牙根種質(zhì)進行驗證,電泳結(jié)果顯示擴增條帶清晰、多態(tài)性高,證明該體系穩(wěn)定可靠,這一優(yōu)化體系的建立為今后利用SRAP標記技術(shù)對狗牙根進行分子生物學(xué)研究提供了幫助。
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