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本研究以狗牙根幼葉為為試材,采用單因子試驗(yàn)和正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)2種方法,對(duì)SRAP-PCR反應(yīng)體系進(jìn)行優(yōu)化試驗(yàn),結(jié)果表明狗牙根25μLSRAP-PCR最佳反應(yīng)體系為:1.5mmol/LMg2+、0.25mmol/LdNTP、0.4μmol/L引物、1.5UTaq酶和80ng模板DNA,最佳退火溫度為50.6℃。運(yùn)用該體系對(duì)30份狗牙根種質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證,電泳結(jié)果顯示擴(kuò)增條帶清晰、多態(tài)性高,證明該體系穩(wěn)定可靠,這一優(yōu)化體系的建立為今后利用SRAP標(biāo)記技術(shù)對(duì)狗牙根進(jìn)行分子生物學(xué)研究提供了幫助。
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