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利用全轉(zhuǎn)錄工程(Global transcription machinery engineering,gTME)方法對野生型釀酒酵母(Saccharomyces scerevisiae)GX7菌株進(jìn)行了改造。通過PCR方法克隆獲得釀酒酵母轉(zhuǎn)錄因子spt15基因,與表達(dá)載體pYX418連接,構(gòu)建了重組子pYX418-spt15,并對SPT15蛋白的177、195和217位點(diǎn)進(jìn)行了定點(diǎn)突變,然后醋酸鋰轉(zhuǎn)化入釀酒酵母GX7中,利用不同濃度的G418抗性篩選得到重組突變釀酒酵母菌株GX7-1,經(jīng)初步研究表明:重組菌株細(xì)胞表型發(fā)生了變化,生長速度加快,并可以發(fā)酵木糖生成木糖醇和乙醇。為構(gòu)建新型工業(yè)釀酒酵母奠定了理論基礎(chǔ)。
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目的:制備殼聚糖-聚乙烯醇復(fù)合凝膠基質(zhì),考察不同相對分子質(zhì)量,不同濃度的殼聚糖對復(fù)合凝膠的抗菌抑菌性能的影響。方法:采用一劑量法對不同相對分子質(zhì)量不同濃度的殼聚糖凝膠、殼聚糖-聚乙烯醇復(fù)合凝膠對大腸桿菌的抑菌效果進(jìn)行比較。結(jié)果:隨殼聚糖濃度增大對大腸桿菌抑菌效果逐漸增強(qiáng),隨殼聚糖相對分子質(zhì)量的減小抑菌效果增強(qiáng),但相對分子質(zhì)量小于5 000時無抑菌圈。結(jié)論:明確了殼聚糖相對分子質(zhì)量和濃度對殼聚糖-聚乙烯醇復(fù)合凝膠抗菌抑菌作用的影響。確定殼聚糖-聚乙烯醇復(fù)合凝膠中殼聚糖適宜的相對分子質(zhì)量為60 000、濃度為2%。殼聚糖作為一種新的藥用材料與聚乙烯醇合用對大腸桿菌具有良好的抑菌作用,為新藥開發(fā)奠定良好基礎(chǔ)。
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